番红-固绿染色（软骨）在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中，常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中，起源于上世纪60年代的番红O（safranin O）-固绿（fast green）染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。软骨呈红色，成骨呈绿色。
一、染色步骤：
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、固绿染色：切片入固绿染液5-10min，水洗去多余染液，至软骨呈无色，分化液稍浸
泡，自来水稍洗。
3、番红染色：切片入番红染液15-30s，三缸无水乙醇快速脱水。
4、透明封片：干净的二甲苯透明5min，中性树胶封片。
5、显微镜镜检，图像采集分析。
二、染色结果
软骨呈红色或橙红色，背景绿色。
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